PCR實驗室,也叫臨床基因擴增實驗室,是專門用於檢測艾滋病、乙型肝炎、禽類和其他感染性疾病的實驗室。整理了 PCR實驗室的施工規範,並附上 PCR實驗室儀器設備清單,供大家參考~
用 PCR方法擴增包含在病毒體內的基因,可以檢測感染者體內是否含有某種病毒。該法具有靈敏、特異、快速、對樣品要求低等優點,因而受到廣泛的重視。PCR實驗已廣泛應用於臨床診斷,各防疫檢測部門對禽類疾病的診斷。
但這類實驗需要有安全的環境、合理配置的實驗室、規範的操作。近幾年, PCR實驗室的建設越來越規範和重視。
本論文從基因擴增檢測實驗室的平麵布置、空調通風係統設計、氣流控製、汙染防治等幾個方麵闡述了實驗室設計中的主要特點,並附上了 PCR實驗室常用設備清單。
一、 PCR實驗室平麵布置
臨床基因擴增檢測實驗室原則上分為四個獨立的工作區:試劑準備區、製樣區、擴增反應混合物配製和擴增區、產物分析區。為了避免交叉汙染,進入各個工作區域必須嚴格沿一個單一的方向進行,即隻能從試劑貯存與準備區→標本製備→擴增反應混合物配製和擴增反應區→產物分析區。
在實驗區域間,應采用傳送窗將試劑和樣品傳送。
二 PCR實驗室的空調通風係統與壓力控製
PCR實驗室沒有嚴格的淨化要求,但為了避免各試驗區間可能出現交叉汙染,建議采用全送全排氣流組織。與此同時,應嚴格控製送、排風量,保證各試驗區的壓力要求。
1、 PCR實驗室試劑儲藏及準備區
試驗區主要進行的操作是:貯存試劑的準備、試劑的分裝、主反應混合液的製備。
對於氣流壓力的控製,本區並無嚴格要求。
2、 PCR實驗室的標本製備區域
在這一地區主要進行的操作包括臨床標本的保存、核酸(RNA、 DNA)的提取、儲存以及添加到擴增反應管中 cDNA的合成。
3、 PCR實驗室擴增反應混合物的配製及擴展區
本區操作以 DNA或 cDNA擴增為主。
4、 PCR實驗室擴增產物分析區
在這一地區主要進行的是擴增片段的測定。如果用全自動封閉分析儀器檢測,這個區域可以不設。
三、 PCR實驗室汙染防治措施
PCR實驗室設計的核心是如何防止汙染。實踐中,汙染主要表現為:擴增產物的汙染、天然基因組 DNA的汙染、試劑汙染和標本間的汙染。因為當汙染發生時,實驗必須停止,直到找到汙染源為止,並且結果必須無效,需要重新進行實驗。因此出現汙染後再圍繞實驗室尋找汙染源不僅費時又麻煩,浪費人力物力。所以要避免汙染,首先應該是預防,而非排除。
1.嚴格劃分工作區域
2.係統的合理設置
3.標準操作
4、嚴苛管理
5、實驗室配套齊全